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酶联诊断试剂常用的两大洗涤方式介绍
   酶联诊断试剂常用的两大洗涤方式介绍
  酶联诊断试剂是酶免疫测定技术中应用较广的技术。其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体 ( 聚苯乙烯微量反应板 ) 表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除。常用的 ELISA(酶联免疫吸附试验)法有双抗体夹心法和间接法,前者用于检测大分子抗原,后者用于测定特异抗体。
  酶联诊断试剂具有快速、敏感、简便、易于标准化等优点,使其得到迅速的发展和广泛应用 。尽管早期的试剂盒由于特异性不够高而妨碍了其在实际中应用的步伐,但随着方法的不断改进、材料的不断更新,尤其是采用基因工程方法制备包被抗原,采用针对某一抗原表位的单克隆抗体进行阻断酶联诊断试剂试验,都大大提高了酶联诊断试剂的特异性,加之电脑化程度极高的检测仪的使用,使酶联诊断试剂更为简便实用和标准化,从而使其成为广泛应用的检测方法之一。
  酶联诊断试剂靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质,以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。对于酶联诊断试剂的洗涤主要有两大方法,那今天酶联诊断试剂厂家就给大家简单讲解下哦。
  一、浸泡式
  1.吸干或甩干孔内反应液;
  2.用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去);
  3.浸泡,即将洗涤液注满板孔,放置1-2分钟,间歇摇动,浸泡时间不可随意缩短;
  4.吸干孔内液体,吸干应彻底,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液体后在清洁毛巾或吸水纸上拍干;
  5.重复操作c和d,洗涤3-4次(或按说明规定)。在间接法中如本底较高,可增加酶联诊断试剂洗涤次数或延长浸泡时间。
  二、流水冲洗式
  开始用于小珠载体的洗涤,洗涤液仅为蒸馏水甚至可用自来水。洗涤时附接一特殊装置,使小珠在流水冲击下不断地滚动淋洗,持续冲洗 2分钟后,吸干液体,再用蒸馏水浸泡2分钟,吸干即可。浸泡式犹如盆浴,流水冲洗式则好比淋浴,其洗涤效果更为彻底,且也简便、快速。已有实验表明,流水冲洗式同样也适用于微量滴定板的洗涤。酶联诊断试剂洗涤时设法加大水流量或加大水压,让水流冲击板孔表面,洗涤效果更佳。
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