小鼠抗IgG单克隆抗体的制备方法
小鼠抗IgG单克隆抗体在生物学和医学研究领域中显示了极大的应用价值,是亲和层析中重要的配体,是免疫组化中主要的抗体,是免疫检验中的新型试剂,是生物治疗的导向武器。作为医学检验试剂,可以充分发挥其优势。单克隆抗体的特异性强,可将抗原抗体反应的特异性大大提高,减少了可能的交叉反应,使试验结果可信度更大。单克隆抗体的均一性和生物活性单一性使抗原抗体反应结果便于质量控制,利于标准化和规范化。
小鼠抗IgG单克隆抗体即单个B淋巴细胞克隆所分泌的抗体。抗体主要由机体的B淋巴细胞合成,每个B淋巴细胞有合成一种抗体的遗传基因。当机体受抗原刺激时,抗原分子上的许多决定簇分别激活各个具有不同基因的B细胞。被激活的B细胞分裂增殖形成该细胞的子孙,即克隆。如果选出一个合成一种抗体的细胞进行培养,就。单克隆抗体是单个B淋巴细胞克隆后产生的专门针对一种抗原决定簇的抗体单克隆抗体是单个B淋巴细胞克隆后产生的专门针对一种抗原决定簇的抗体单克隆细胞合成的针对一种抗原决定簇的抗体称为单克隆抗体。小鼠抗IgG单克隆抗体可以检测出多种病毒中非常细微的株间差异,鉴定细菌的种型和亚种。
小鼠抗IgG单克隆抗体的制备是以细胞融合并培养为原理进行的,它是一种抗体,是一种克隆化的细胞株,能够稳定的分泌特定的单克隆抗体。克隆有多种含义,克隆的定义1:一个共同前体通过无性繁殖而形成的一群基因结构相同的细胞或个体。对于基因克隆,则指一个基因反复扩增后产生的多个拷贝。定义2:来自同一个祖先、经过无性繁殖所产生相同的分子。
单克隆抗体制备有两种方法:
一种方法是:增量培养法,即将杂交瘤细胞在体外培养,在培养液中分离单克隆抗体。该法需用特殊的仪器设备,一般应用无血清培养基,以利于单克隆抗体的浓缩和纯化。
二也是普遍采用的方法是小鼠腹腔接种法。选用BALB/c小鼠或其亲代小鼠,先用降植烷或液体石蜡行小鼠腹腔注射,一周后将杂交瘤细胞接种到小鼠。小鼠抗IgG单克隆抗体直接在体外培养都可以。