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粪便钙卫蛋白检测,取样有哪些注意事项?


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炎症性肠病(IBD)是一组慢性非特异性肠道炎症性疾病,粪便钙卫蛋白(FC)在该病的管理中是较为理想的检测标志物。但FC的检测结果易受多种因素影响,仅在取样过程中就存在诸多变异因素,其应用价值受到限制,因此如何规范FC的实验室检测是IBD诊断中重要的一环。

 

炎症性肠病和粪便钙卫蛋白

近年来,炎症性肠病(IBD)在我国的发病率不断升高,已经成为消化科较为常见的疾病。

炎症性肠病主要包括克罗恩病(CD)和溃疡性结肠炎(UC)两种类型,临床上以腹痛、腹泻为主要消化道表现,以发热、消瘦、贫血为主要全身性表现。这些非特异性表现与肠道易激综合征极易混淆,而FC的检测却能很好的把两种病人区分开,医学研究者能通过 粪便钙卫蛋白检测的结果进行病情严重程度评估,从而减少不必要的肠镜检查。

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钙卫蛋白是 S100 蛋白家族中的一种钙锌结合蛋白,其存在于中性粒细胞胞浆中,当肠道炎症通透性增加后会促进中性粒细胞向肠腔迁移,导致 粪便钙卫蛋白水平增高。FC成分较为稳定,有较好的耐热性,不易被细菌和各种酶类破坏。

在欧洲,克罗恩病以及结肠炎组织( ECCO) 以及世界胃肠病组织( WGO) 的共识指南中,粪便钙卫蛋白被认为是一种较为理想的 IBD 无创性标志物。粪便钙卫蛋白试剂盒对于IBD的诊断、活动性评估及疗效监测具有较好的临床价值,并具有试剂价廉、检测无创、患者接受程度高和操作方便等多种优点,对于减少非必需的肠镜检查,更好的提升患者体验具有重要的意义。

 

FC实验室规范化操作指南

然而,粪便钙卫蛋白检测目前缺少有效的外部商用质控品,患者年龄、用药及标本等因素也影响检测的准确性,这为炎症性肠病的鉴别带来一定难度。FC检测结果的有效性和可靠性与实验规范密不可分,我们除了规范取样流程,其它因素如患者年龄、用药、肠道准备及血液影响等因素也应当规范化。

 

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标本影响因素及注意事项


                 标本影响因素

注意事项

标本留取

时间

同一患者同一天不同时间段所排出的粪便的FC含量之间也有较大差异,排便的次数与排便 间隔的长短也会对结果产生影响

清晨第 1 次排便的标本推荐作为检测样本

标本留取

方式

不规范的留样却很可能对检测结果产生较大影响

用规范的留样杯,在留样过程中保持样品清洁,避免水分蒸发或混入水份

标本采样

萃取方式

粪便称重采样是采样方式的“金标准",目前主流的商业化检测试剂盒大多采用定量萃取管对粪便进行萃取,实际操作中粪便性状多样,单一萃取管萃取法,可能无法确保定量结果的准确性

如对于固态便以及糊状便,可用萃取管直接进行采样,而对于水样便,则应使用移液枪定量加样。

不同的试剂盒所采用的定量萃取管的结构、设计原理、精密度也不尽一致,使用不同萃取管也会造成 FC 结果变化。

使用与试剂盒同厂家的萃取系统,减少差异。对于非常异质样的样本,建议使用涂布器或者类似的设备进行手工均匀化

标本采样

位置

在同一标本的不同位置采样,其 FC 检测结果也会有较大差异。同一标本不同位点的 FC 检测值之间差异最大可达 23%。

采样时建议避开血液和黏液部分,在样本头、体、尾至少 3 个不同位置均匀取样

标本存储

时间和温度

FC 在室温下的稳定时间尚未有一致结论,最短是 1 d,最长可以到 7 d。

对 FC 检测建议新鲜标本尽快送检

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温馨提示:考虑到粪便标本的变异因素较多,各种条件对检测水平产生的影响还难以确定,在实际科研中应该进行连续多次检测,以确保结果的可靠性和有效性。

 

▲标本影响因素及注意事项

 

德国DRG粪便钙卫蛋白试剂盒

德国DRG出品的EIA-5415粪便钙卫蛋白试剂盒,基于ELISA夹心法原理,可以用于定量检测粪便样品中的钙卫蛋白。该试剂盒建议与制样系统EIA-5674配套应用,以减少不同品牌萃取管差异引起的标本取样差异,更接近良好的实验效果。

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科润达生物作为德国DRG的中国代理,能够为各界用户稳定供应粪便钙卫蛋白试剂盒,并提供科研代测,上门代测和实验技术指导等服务。我们欢迎您致电,无论是亲自下单还是咨询技术问题,我们将真诚为服务。

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