检测所需材料(未提供):
酶标仪(450±10nm)
洗板机
吸水纸
蒸馏水
移液器
储存条件:
储存于2~8℃的环境下时在有效期内稳定。过了有效期的试剂请勿使用。开封了的试剂必须储存于2~8℃的环境下。微孔板也必须储存于2-8℃的环境下。铝铂金属袋一旦打开,就应当小心把它重新密封起来。开封的试剂盒如储存于如上所述环境下,其活性可维持六周。
检测步骤:
每次检测都会有一条标准曲线。
1.将所需数量的板条置于板架上
2.将标准品、质控品和样品分别25µL置于板架上
3.室温下温育5分钟
4.在每一微孔中加入200µL酶标物
5.充分混合10秒钟,在这一步骤中充分混合非常重要
6.室温下温育60分钟
7.快速振荡微孔内成分,每孔用400µL洗涤液清洗微孔3次,在吸水纸上拍干
特别注意:洗涤步骤的正确操作与否明显影响整个实验的灵敏度和准确度
8.每一微孔中加入200µL底物液
9.室温下温育30分钟10)
10.每一微孔中加入100µL终止液以终止酶免反应
11.加终止液后10分钟之内在450±10nm的酶标仪上读取OD值