百日咳杆菌毒素（PT）IgG检测试剂盒的检测要求涵盖样本采集与处理、试剂盒使用、实验操作规范、结果判定与解释、质量控制与安全防护等多个方面，具体如下：
一、样本采集与处理要求
样本类型：支持血清、血浆、细胞上清及相关液体样本的检测。
采集方法：
血清：室温下血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分），收集上清。保存过程中如出现沉淀，应再次离心。
血浆：根据标本要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分），收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。
其他样本：如尿液、胸腹水、脑脊液等，需离心后收集上清。细胞培养上清需根据检测成分类型进行离心或冻融处理后收集上清。组织标本需匀浆后离心收集上清。
保存条件：
样本采集后应尽早进行提取和实验。若不能马上进行试验，可将样本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
血清/血浆样本在2-8℃冷藏保存可稳定8天，建议在8天内使用；全血样本应即采即用；若需长期保存，血清/血浆样本直接-20℃冷冻保存可稳定一年，冻存次数建议不超过3次。
样本质量：避免使用溶血、浑浊、脂血、黄疸血及被污染的样本。
二、试剂盒使用要求
试剂盒保存：试剂盒应保存在2-8℃的环境中，避免冻结。未开封试剂盒自生产日起可稳定保存一定时间（如6个月或1年，具体以试剂盒说明书为准）。
试剂准备：
使用前应将试剂盒从冷藏环境中取出，在室温下平衡15-30分钟。
浓缩洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。
三、实验操作规范
加样：
分别设空白孔（不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。
在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液，然后再加待测样品（具体加样量和稀释倍数根据试剂盒说明书操作）。
加样时应将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
温育：用封板膜封板后置37℃温育一定时间（如30分钟）。
洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置一定时间后弃去，如此重复数次（如5次），拍干。
加酶：每孔加入酶标试剂（空白孔除外），再次温育和洗涤。
显色：每孔先加入显色剂A，再加入显色剂B，轻轻震荡混匀，37℃避光显色一定时间（如15分钟）。
终止：每孔加终止液终止反应（此时蓝色立转黄色）。
测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后一定时间内（如15分钟以内）进行。
四、结果判定与解释
定性检测：根据OD值与阴性对照OD值的比值（P/N值）或直接根据显色情况判定结果。如P/N值在一定范围内为可疑标本，小于一定值为阴性等。
定量检测：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线。根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度，再乘以稀释倍数得到样品的实际浓度。
结果解释：结合临床情况和其他检测结果对检测结果进行综合解释。如PTIgG抗体含量高于一定值可能表明机体近期百日咳感染或具有免疫保护水平等。
五、质量控制与安全防护
质量控制：
每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。
如标本中待测物质含量过高，应先用样品稀释液稀释一定倍数后再测定，计算时乘以总稀释倍数。
定期对试剂盒进行性能验证和质量控制检测。
安全防护：
所有样品、洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
操作时应穿戴防护服、手套和口罩等防护用品，避免直接接触样本和试剂。
实验结束后应对实验台面和仪器进行清洁和消毒。
