干货!酶联诊断试剂的工作原理讲解
酶联诊断试剂在国内有许多种叫法,如:ELISA 检测试剂盒、 ELISA Kit 、酶联免疫吸附测定试剂盒、 酶联免疫分析试剂盒、酶免试剂盒等,比较常见的叫法是 ELISA 检测试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒等。它是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。
酶联诊断试剂是酶免疫测定技术中应用较广的技术,其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体 ( 聚苯乙烯微量反应板 ) 表面,使酶标记的抗原抗体反应在固相表面进行,用洗涤法将液相中的游离成分洗除。常用的酶联诊断试剂检测方法有双抗体夹心法和间接法,前者用于检测大分子抗原,后者用于测定特异抗体。
酶联诊断试剂的工作原理:
促卵泡素(FSH)是动物脑垂体分泌作用于卵巢卵泡生长、发育、分化、成熟和排卵的重要繁殖激素。由于是生物大分子,不能透过细胞膜,FSH必须与靶细胞膜上的促卵泡素受体(FSHR)结合,经过受体介导将信息传递到靶细胞内,才能发挥其生物学功能。预先包被的抗体为多克隆抗体,检测相抗体也为多克隆抗体,经生物素标记。样品和生物素标记抗体先后加入酶标板孔反应后,PBS或TBS洗涤。随后加入过氧化物酶标记的亲和素反应;经过PBS或TBS的*洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成黄色。酶联诊断试剂颜色的深浅和样品中的待测因子呈正相关。