人半乳糖缺乏IgA1（Gd-IgAⅠ）试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人半乳糖缺乏IgA1（Gd-IgA1）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并*洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人半乳糖缺乏IgA1（Gd-IgA1）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

 

　　人半乳糖缺乏IgA1（Gd-IgAⅠ）试剂盒操作步骤：

 

　　1、从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

 

　　2、设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

 

　　3、样本孔中加入待测样本50μL；空白孔不加。

 

　　4、除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

 

　　5、弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μL），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。

 

　　6、每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

 

　　7、每孔加入终止液50μL，15min内，在450nm波长处测定各孔的OD值。

 

　　实验结果计算：

 

　　以所测标准品的OD值为横坐标，标准品的浓度值为纵坐标，在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线，并得到直线回归方程，将样品的OD值代入方程，计算出样品的浓度。

 

　　人半乳糖缺乏IgA1（Gd-IgAⅠ）试剂盒性能：

 

　　1、检测范围：62.5U/mL–2000U/mL。

 

　　2、灵敏度：检测浓度小于10U/mL。

 

　　3、特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

 

　　4、重复性：板内变异系数小于10%，板间变异系数小于15%。