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产品名称:血管紧张素 I (血浆肾素活性)检测试剂盒

产品型号:DB52011

更新时间:2020-05-28

产品报价:

产品特点:血管紧张素 I (血浆肾素活性)检测试剂盒试剂盒可用于检测PRA(血浆肾素活性),检测方法是通过测量单位时间每体积里产生的血管紧张素-1(Ang-1)的质量。(ng/ml.h)

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DB52011血管紧张素 I (血浆肾素活性)检测试剂盒的详细资料:

血管紧张素 I (血浆肾素活性)检测试剂盒

 

【产品名称】

通用名称:血管紧张素I(血浆肾素活性)检测试剂盒(酶联免疫法)

英文名称:Angiotensin I (PRA) ELISA

 

【产品规格】

96T

 

【预期用途】

该试剂盒可用于检测PRA(血浆肾素活性),检测方法是通过测量单位时间每体积里产生的血管紧张素-1Ang-1)的质量。(ng/ml.h

 

前言简介

测量PRA值对于临床评估高血压病人的身体状况是非常有用的。尤其可用于诊断原发性醛固酮增多症(占高血压患者5-13%)并且帮助治疗和管理其他类型的高血压患者。相比与检测肾素浓度,该检测方法能更准确的检测原发性醛固酮增多症。原因如下:

  1. PRA值是血管紧张素-1的生成率,它是通过肾素的酶促作用,由底物血管紧张素原转变而来。这就在依赖肾素浓度的同时,也需要依赖血管紧张素原的浓度。而这在肾素浓度检测中是被忽略掉的。
  2. 在低浓度的情况下,血浆肾素浓度测试的灵敏度得不到保证。而PRA分析却可以通过延长生成步骤中的温育时间来提高灵敏度。
  3. 当抑制剂结合肾素活性位点时,PRA就会被抑制。而在有抑制剂的情况下,肾素却依旧能被相应的抗体所识别出来。因此肾素浓度并不总是和血浆肾素活性相关。

肾素将血管紧张素原转化为血管紧张素-1,然后大部分1型在肺循环中被血管紧张素转换酶(ACE)转变为2型。2型血管紧张素能够通过一系列作用升高血压:收缩小动脉、促进钠的重吸收、刺激肾上腺皮质分泌醛固酮。醛固酮同样也会影响钠的代谢并升高动脉血压。

由于血管紧张素-2在血液样本中非常不稳定,因此非常难以准确地测量其在循环

系统中的浓度。但是醛固酮的浓度却能用IBL公司生产的试剂盒轻松的检测出来。

 

【检测原理】

1.生成步骤

采集EDTA血液,分离出血浆。分离出的血浆应该在室温下立即用于检测,如果不能,需冷冻保存。样本在采集和未调节PH前的处理过程中,不能放在冰上或者在0-10℃间保存。这样会导致测量出的结果偏高。实验开始前需加入蛋白酶抑制剂和生成缓冲液,这样能够防止血管紧张素-1在血浆中被降解。加入缓冲液后,样本PH会在6.0左右。之后把样本分成两部分,一部分在0-4℃,另一部分在37℃下准确温育90分钟或者更长时间,这个过程中血浆肾素会催化底物生成血管紧张素-1。把PH调整到6.5或者7.4。这一步骤非常关键,一旦酸化到PH3.3或者更低再调回中性就会造成肾素不可逆的活化;而如果PH大于8.0,那就会破坏掉肾素。该温育的过程牵涉到了另一组蛋白酶抑制剂,它能在终止生成反应的同时,防止血管紧张素-1被降解成小段的肽链。

2.测量步骤

该检测使用竞争法,有2个温育步骤,总温育时间不到2个小时。*次温育时,未标记的血管紧张素-1(样本、标准品以及质控品中的)与生物素化的血管紧张素-1竞争抗体。链霉亲和素标记的辣根过氧化物酶连结到固化的生物素-血管紧张素-1上。洗板洗去未结合的材料。然后加入酶底物液反应,反应一段时间后加入终止液并测量吸光值。吸光值大小与样本中血管紧张素-1浓度成反比。标准品的值可用于绘制标准曲线,样本的值可直接在标准曲线上读出。

【试剂盒组成成分

生成缓冲液

1×5ml

含缓冲液和无毒性的抗生素

 

现配

0.5ml95%乙醇到瓶中,完全溶解。使用后冷藏,不用时请勿开盖(蛋白酶抑制剂)

微孔板

2×12×8

296孔的微孔板,包被有抗血管紧张素-1抗体、包装袋中含干燥剂

生物素化A-

1×30ml

缓冲液、蛋白酶抑制剂、生物素化血管紧张素-1、无汞防腐剂

亲和素-HRP

1×0.5ml

蛋白缓冲液、亲和素-HRP复合物、无汞防腐剂、检测前用分析缓冲液1100稀释、8小时稳定

标准品

含合成A-Ⅰ多肽、蛋白合成液、无汞防腐剂标准品A 2ml B-H 0.7ml 浓度00.20.51.44102560ng/ml (体积为近似值,实际体积请看瓶上标签)

质控品

2×0.7ml

含血管紧张素-1、蛋白缓冲液、无汞防腐剂、具体浓度见瓶身标签

分析缓冲液

1×40ml

蛋白缓冲液、无汞防腐剂

洗液浓缩液

2×50ml

10倍浓缩、含缓冲液、非离子型洗涤剂、无汞防腐剂、使用前1:10稀释

TM底物液

1×32ml

含四甲基联苯胺、双氧水、不含DMFDMSO

终止液

1×12ml

1M硫酸

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