人GROβ检测试剂盒(酶联免疫法)
【产品名称】
通用名称:人GROβ检测试剂盒(酶联免疫法)
英文名称:Human GROβ Assay Kit
【规格】
96T
【预期用途】
人GROβ检测试剂盒(酶联免疫法)可用于定量检测人血清、EDTA-血浆和细胞上清液中的GROβ。重组和天然形式GROβ均可检测。本产品仅用于研究,不用于诊断。
【前言简介】
人GROβ是一个7.9 kDa的蛋白质,包含73个氨基酸残基。人类GROβ是C-X-C趋化因子家族中的一员,可促进中性粒细胞和嗜碱性粒细胞趋化和脱颗粒。GROβ类似GROα以剂量依赖的方式特异性抑制生长因子刺激的毛细血管内皮细胞的增殖。
【检测原理】
本试剂盒基于固相夹心法原理,利用两种高特异性抗体进行检测。四甲基联苯胺(TMB)作为一种显色原,显色强度与人GROβ的量成正比。
【试剂盒组分】
1)微孔板: 96孔,包被抗人GROβ(C)兔IgG亲和纯化
2)标记抗体: 30倍浓缩,1x0.4ml,HRP-抗人GROβ兔IgG Fab’亲和纯化
3)标准品: 2x0.5ml,重组人GROβ
4)EIA缓冲液: 1x30ml
5)标记抗体溶液: 1x12ml
6)底物液: 1x15ml
7)终止液: 1x12ml
8)洗涤缓冲浓缩液: 1x50ml,40倍浓缩
【试剂制备】
(1)洗涤缓冲液
使用前平衡至室温,并轻轻混合均匀
50mL洗涤缓冲浓缩液+1950mL蒸馏水,混合均匀,得到洗涤缓冲液工作液,稀释后的洗涤缓冲液在冰箱中可储存2周
(2)标记抗体
在一次性试管中用标记抗体溶液30倍稀释标记抗体浓缩液,若使用1条微孔板(8孔),需要800μL标记抗体,即30μL标记抗体浓缩液+870μL标记抗体溶液,混合均匀
仅在使用前进行制备,标记抗体浓缩液应在4℃下密封储存
(3)标准品
向标准品中加入0.5mL蒸馏水使其充分的溶解,得到的标准品浓度为5000pg/mL。
准备9支试管并向每支试管中加入230μL EIA缓冲液
将230μL重建后的标准品加入试管1中,轻轻混匀;将230μL试管1中溶液加入试管2中,混合均匀。连续2倍稀释制备9个标准品浓度,范围为2500 - 19.53pg/mL,试管8浓度为0pg/mL,作为样本空白
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