溶组织内阿米巴IgG检测试剂盒(酶联免疫法)
问:ELISA方法有哪些特点?
答:ELISA方法的特点是检测时间短、检测效果准确、灵敏度高、特异性强、无需特殊仪器、操作简单方便。
通用名称:溶组织内阿米巴IgG检测试剂盒(酶联免疫法)
英文名称:Entamoeba histolytica IgG ELISA
产品货号:RE58631
产品规格:96T
检测样本:血清和血浆
公司品牌:德国IBL
储存条件:2-8℃
检测方法:ELISA方法
预期用途:可用于人血清或血浆(柠檬酸)中抗溶组织内阿米巴IgG抗体的定性检测
参考价格:询价
供应商家:深圳市科润达生物工程有限公司
试剂盒预期用途
溶组织阿米巴IgG抗体检测试剂盒RE58631可用于人血清或血浆(柠檬酸)中抗溶组织内阿米巴IgG抗体的定性检测。特别是无症状溶组织内阿米巴携带者和再次感染溶组织内阿米巴的鉴定。
溶组织内阿米巴简介
溶组织内阿米巴是一种厌氧型的寄生虫,会形成一个带有4核心的直径10-15UM的囊泡。囊泡非常的坚固并且能抵抗不良的外界环境。当进入易被感染的宿主体内后,它的外壁就会打开一个缺口,让阿米巴暴露出来。之后阿米巴会在三个周期内连续的分裂,形成8个分裂体。
一些分裂体就会侵入大肠组织,大范围的腐蚀之后它们就能得以进入血液系统,然后它们可以到达全身各个部位。溶组织内阿米巴引起的疾病是全球性的。它是引起阿米巴病和阿米巴痢疾的病原体。它们主要寄居在大肠的腔和粘膜上(主要是横结肠和盲肠)。
额外的,肠道阿米巴可以影响全身各个器官和组织。大多数感染者是没有症状的,而这些无症状感染者的高发病率就使问题复杂化。那些出现症状的患者会出现各种各样的症状。不论年龄大小和性别不同,所有人都有感染的可能性。不良的卫生环境会时感染的可能性增加。在农业工作者和男同性恋群体中,该疾病的流行呈现增长趋势。
试剂盒检测原理
定性检测抗溶组织内阿米巴IgG抗体的此试剂盒采用ELISA的原理。微孔板的微孔中包被了溶组织内阿米巴抗原,这些抗原可以结合样品中相应的抗体。洗板除去未结合的样品,再加入辣根过氧酶标记的蛋白A酶联物。
加TMB后会出现蓝色反应产物,形成了可见的免疫复合物。反应液的颜色强度与样品中溶组织内阿米巴特异性抗体的。浓度成正比。之后加入硫酸终止酶反应,反应液变成黄色。450nm处读取OD值。
溶组织阿米巴IgG抗体检测试剂盒RE58631组成成分
●微孔板——12×8——包被有特异性抗原
●样本稀释液——1×100ml——可用于样品稀释、pH7.2±0.2、黄色、白盖、即用型
●终止液——1×15ml——含硫酸、0.2mol/l、即用型、红盖
●洗涤液——1×50ml——20倍浓缩、pH 7.2±0.2、白盖
●酶联物——1×20ml——辣根过氧化物酶标记的蛋白A、蓝色、黑盖、即用型
●底物液——1×15ml——含TMB、黄盖、即用型
●阳性质控——1×2ml——黄色、红盖、即用型
●临界质控——1×3ml——黄色、绿盖、即用型
●阴性质控——1×2ml——黄色、蓝盖、即用型
实验所需材料(但试剂盒不提供)
●移液器,10-1000 µL
●酶标仪
●37℃温育箱
●手动或自动洗板系统
●混合器
●去离子水
●一次性管
●计时器
溶组织内阿米巴IgG检测试剂盒检测步骤
请至少做以下几个孔:
●1孔(例A1)做空白对照孔
●1孔(例B1)做阴性质控
●2孔(例C1+D1)做临界质控
●1孔(例E1)做阳性质控
如果有必要的话,我们建议您质控和病人样品做双份检测。照说明书给出的实验步骤进行操作,并避免不同步骤之间的时间隔无明显差别。加质控品和样品时都应当用新的取样吸头。把恒温箱调至37±1℃
●将质控品和稀释好的样品分别100µl加入到相应的微孔中,留下A1做空白对照孔。
●盖板。
●37±1℃下温育1h±5分钟
●温育后,移去封板纸,弃取孔内反应液,用300µl洗涤液洗板3次。避免反应孔中的液体溅出。每次洗板间的浸润时间都应大于5秒。最后在吸水纸上拍干。
注意:洗板步骤很重要,洗板不充分将可能导致结果不精确或错误的OD值。
●除空白孔外,在每一微孔中都加入100µl组织阿米巴蛋白A酶标物,盖板。
●室温下温育30min,避免太阳直射
●重复步骤4
●在每一微孔中加入100µlTMB底物液
●室温下避光温育15分钟
●按加TMB底物液的顺序和速度在每一微孔中加入100µl终止液。
温育之后,微孔板内试剂的颜色由蓝色变为黄色
注意:高阳性的病人样品会引起染色剂沉淀。这些沉淀物会影响OD值的读取。例如:我们建议按1:1的比例用生理盐水预先稀释样品。然后按1:100的比例用稀释液稀释样品,并将结果乘以2。
●加终止液后30min之内在450/620nm处读取OD值。
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