GIP人胃肠激素多肽检测 ELISA试剂盒，IBL品牌，科润达生物代理

检测原理

该人胃肠激素多肽试剂盒是使用2种高度特异性抗体的固相夹心ELISA。四甲基联苯胺（TMB）用作着色剂（Chromogen）。染色程度与人类总GIP的数量成比例。

检测样本

人EDTA-血浆

在人胃肠激素多肽活性形式的情况下，GIP也用相同的样品测量，收集样品时必须加入DPPIV抑制剂，或使用特制的血液收集管以保护GIP。

细胞培养上清液

储存条件

GIP人胃肠激素多肽检测 ELISA试剂盒在2-8℃保存，有效期见试剂盒外包装。

实验步骤

使用前，将所有试剂应平衡至室温，大约30min，充分混匀，确保试剂质量无改变，标准曲线和样品检测必须同时进行。

1) 确定试剂空白孔，并加入100ul EIA缓冲液。

2) 确定样本空白孔、样本孔和标准品孔，并将样本空白（管8），样本和标准品（管1-7）100ul分别加入相应的孔中。

3) 盖板，37℃孵育60min。

4) 洗板，倒去孔内反应液，按要求加入预先准备好的洗涤液(每孔不少于350ul)，，再弃去废液。重复洗板4次。在吸水纸上拍干，去除残留液滴。

5) 除试剂空白孔外，将其余每孔中加入100ul 准备好的标记抗体。

6) 盖板，4℃孵育60min。

7) 洗板，倒去孔内反应液，按要求加入预先准备好的洗涤液(每孔不少于350ul)，，再弃去废液。重复洗板5次。在吸水纸上拍干，去除残留液滴。

8) 取需要量的底物液到一次性检测管中，每孔加入100ul TMB溶液。为了避免污染，检测管中剩余的底物液不得再次放回原底物液瓶中。

9) 黑暗中室温孵育30min，颜色变蓝。

10) 每孔加入100ul 终止液终止反应，通过点击板的一面来混合板内溶液，此时颜色变为黄色。

11) 读取OD值：将板底污物清除，并保证板孔内无气泡，以空白孔为对照进行标准品和样本的测量。测量在450nm处进行，参考波长600-650nm，测量应在终止液加入后30min内进行。

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