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宠物兽医ELISA检测工作要注意这几点
   宠物兽医ELISA检测工作要注意这几点
  宠物兽医ELISA检测作为一种在兽医诊断领域新兴的检测技术,因其无可比拟的优势受到了越来越多的关注,也将会引领兽医体外诊断技术发展的潮流。这种采用抗原-抗体结合原理建立的各种检测方法在临床上广泛应用,不仅用于检测各种肿瘤标记物、自身抗体,还可以用于检测感染性疾病标志物和激素等。
  目前,该诊断技术以其具有的灵敏度高、特异性强、简便快速、可进行定性、定量检测等优势,已广泛应用于感染性疾病(包括细菌性感染、病毒性感染、寄生虫、真菌、人畜共患疾病等)、肿瘤等多个领域。其检测结果对临床医疗决策的贡献度进一步提升,检验结果的重要性也达到空前的高度。
  在兽医实验室中,宠物兽医ELISA检测工作的核心问题就在于操作的精准性,所以必须在血样采取与处理、回温、加样、孵育、洗涤、显色和保护工作中对其检测的质量进行控制,才能更好地促进这一工作的重要性彰显。实验时需要注意的这些地方:
  (1)在血样采取与处理过程中应确保采样轻柔,预防出现溶血的情况,这主要是由于红细胞在溶解过程中所释放的物质中具有过氧化物酶活性的特点,进而对检测结果带来影响。而且标本存储的时间较长就会导致LGG聚合为多聚体,进而出现本底过深和假阳性的出现,所以需要及时对血清样板进行测定,并将其放在4℃的保温箱中。若测定的时间超过3天,应将其低温冰存。
  (2)在回温过程中应尽可能地采取低温,一般回温温度只要确保洗涤液的结晶在充分摇动的情况下可以完全溶解即可。
  (3)在加样过程中,由于其涉及的环节较多,所以在采用微量加样器时,应严格按照规定的加入量,将其加入到板孔之中,而且在加样过程中应确保加入的样品处于板孔的底部。这样就能有效预防在孔壁上存在的样品,预防样品溅出的同时还要避免其出现气泡。
  (4)在孵育过程中,由于其在宠物兽医ELISA检测中需要一定的时间,所以其在这一过程中始终处于恒温状态,具体的做法就是在恒温箱中放置ELISA板。同时还要利用封板条将反应孔封住,严禁将反应板叠放,这样就能够有效地预防其蒸发,同时又能够确保每个反应板的温度快速平衡,尽可能地确保温育温度与温育时间的精准性。
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