德国DRG*，货号：EIA5169

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预期用途

此试剂盒用于人血清和血浆中S100B浓度的检测，仅用于实验室

实验原理

此试剂盒基于两抗体与S100B结合，一个抗体固定在包被板上，另外一个则被HRP标记。试验基于两步法，每次洗板后，结合的和游离的就会分离，底物液TMB加入，会发生颜色变化，终止液加入终止反应，吸收值检测。样品中的S100B的浓度计算可从标准品着手。颜色强度与样品中的S100B的浓度成正比

试剂盒组成

1.       S100B标准品，6支，冻干粉，STD0-STD5

2.       质控品，2支，冻干粉，阴性质控和阳性质控

3.       酶联物缓冲液，1支，20ml，Tris缓冲液，BSA10g/L,0.05%吐温

4.       酶联物，1支，1ml，HRP标记的抗S100B

5.       试验缓冲液，1支，12ml，Tris缓冲液，BSA10g/L，稳定剂

6.       包被板，可拆，包被有抗S100B

7.       TMB底物液，1支，15ml，H₂O₂-TMB 0.25g/L，避免皮肤接触

8.       终止液，1支，15ml，0.15mol/L硫酸，避免皮肤接触

9.       洗涤浓缩液，50X，1支，20ml，NaCl 45g/L,吐温20 55g/L

实验所需但试剂盒未提供

1.       去离子水

2.       自动移液器

3.       酶标仪

注意：所有试剂应保存在黑暗处2-8℃，微孔板平衡至室温方可打开包装，使用完后立即密封，不要移去未用板条的粘合条

注意事项

1.       试剂内含有硫柳汞防腐剂

2.       配制和吸取试剂时应按zui高度要求操作

3.       所有试剂都有各自的批号，不要混用不同批次内的物质

4.       S100B的检测范围为10-5000pg/ml

5.       标准品的具体浓度见瓶上标签

6.       不要使用严重溶血样品

7.       避免底物液暴露在阳光，金属或氧化剂下

操作步骤

样品准备

S100B检测可使用人血清或血浆，不要使用溶血样品，样品可在2-8℃下保存1天，更长的保质期的话可放置在-20℃，避免反复冻融，不要将样品放置在室温下的时间过长，样品浓度高于5ng/ml时，应用试验缓冲液进一步稀释

标准品和质控品的准备

用1ml的去离子水配制标准品和质控品，可保存于2-8℃下4周，-20℃6个月，建议分装保存于-20℃。标准品浓度见标签。避免反复冻融和长时间暴露在室温下

酶联物的准备

使用前2小时准备

50ul的酶联物+1.0ml的酶联缓冲液（稀释的酶联物的量与试验样本量成正比），混合5min，避免气泡产生，室温下（22-28℃）可保存3小时

洗涤液准备

10ml的洗涤浓缩液+490ml的去离子水；不同的体积但保持同一稀释比例；室温下（22-28℃）可保存至标签上所示的有效期

实验步骤

建议做双份检测，包括标准品，质控品和样品，还有一个空白对照孔

结果计算

1.       计算每一标准品和样品的平均OD值

2.       以标准品吸收值和浓度绘制一zui合适的标准曲线（三次回归或四参数）

3.       从标准曲线上可直接读取样品浓度

 

 

 

 

 

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