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ELISA试剂盒具体的操作方法介绍
   ELISA试剂盒具体的操作方法介绍
  ELISA试剂盒的特点是可以一同进行许多标本的检测,并可在特定的比色计上迅速读出成果。现在已有多种自动化仪器用于微量反应板型的ELISA检测,包含加样、洗刷、保温、比色等进程,对操作的标准化有重要意义。下面我们来看看关于它的操作方法!
  操作过程:
  1、确认本次检测所需的已包被抗体的酶标板孔数目。
  2、将倍比稀释的规范品各0.1ml顺次参加一排7孔中,1孔只加样品稀释液的作为对照。处理后的标本按100ul每孔参加。
  3、酶标板加上盖,37℃反响90分钟。
  4、反响后用自动洗板机吸去酶标板内的液体;或甩去酶标板内液体,再对着吸水纸拍几下,洗刷2次。
  5、将准备好的生物素抗体工作液按每孔0.1ml顺次参加。37℃反响60分钟。
  6、0.01MTBS或0.01MPBS洗刷3次,每次浸泡1分钟左右。
  7、将准备好的工作液按每孔0.1ml顺次参加。37℃反响30分钟。
  8、按每孔0.1ml顺次参加TMB显色工作液,37℃避光反响,反响过程中,要常常的调查,当肉眼可见规范品的前3-4孔有显着的梯度蓝色,后3-4孔不同不显着时,即可参加停止液0.1ml/孔。(显色反响长不要超越30分钟)。
  9、根据样品的吸光值在坐标上找出对应的浓度。ELISA试剂盒用户也能够使用各种应用软件来核算。应记住由于样品稀释了N倍,其实际浓度应该×N。
  注意以下事项:
  1.试剂盒应在有效期内;
  2.仔细阅读阐明书;
  4.标本制备要规范,每份标本体积要按2-3个复孔以上的量制备,尽量分装做备份。短期内无法实验者,注意低温保存;
  5.依据检测标本数量承认所需试剂的量;
  6.准备好全部实验额定所需物品,如试管、吸头、移液器、离心机等;按说明书将所用ELISA试剂盒平衡至室温,制作所需试剂。
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