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核酸检测为什么不直接唾液检测呢?
 不少人可能会好奇:为什么核酸检测不能直接用棉签蘸唾液来唾液检测呢?原因有两点:
  1.唾液里的病毒量少 病毒一般是定植在呼吸道里,随着呼吸道分泌物向外排出的,因此越靠近咽喉里面,病毒会分布得越多。唾液中的病毒比咽部表皮上要少,检测的敏感度可能会降低。
  2.唾液需要经过液化处理 唾液本身比较黏稠,不能直接拿来检测,需要先进行液化处理。全国每天有大量核酸样本要检测,如果每份都要液化,无疑就会大大增加检测时间。
  目前唾液的检测的样本采集比较方便,处理也比较简单,可检测的用途也越来越广了。本文介绍的唾液铁调素检测试剂盒采用的是ELISA方法,该方法操作简单方便,拥有灵敏度高特异性强的特点,检测时间短,检测结果准确,目前ELISA方法已经在普遍运用。
  检测原理
  唾液铁调素检测试剂盒采用的竞争法。微量滴定孔用针对铁调素分子抗原位点的单克隆(小鼠)抗体包被。患者样品中的内源性铁调素与铁调素-生物素结合物(酶结合物)竞争与被包被抗体的结合。温育后,洗涤微量滴定板以终止竞争反应。
  在随后的温育中,结合的生物素分子用链霉亲和素过氧化物酶(酶复合物)检测。温育后,将板再次洗涤。添加底物溶液后,显色的强度与患者样品中铁调素的浓度成反比。
  检测步骤
  每次运行必须包含一条标准曲线。
  1、在框架固定器中固定所需数量的微量滴定孔。
  2、用新的一次性吸头分配100 ?L的每个标准品,质控品和样品(上清液)到适当的孔中。
  3、在每个孔中分配100 ?L酶联物。*混合10秒钟。在此步骤中进行充分混合非常重要。
  4、在室温下孵育60分钟。
  5、轻摇孔中的内容物。每孔用400 ?L稀释的洗涤溶液冲洗孔4次(如果使用了平板清洗机)-或-每孔用300 ?L稀释的洗涤溶液冲洗孔4次以进行手动洗涤。在吸收纸上剧烈打孔以去除残留的液滴。重要的提示:正确执行洗涤程序会明显影响该测定的灵敏度和精确度!
  6、将100 ?L酶复合物分配到每个孔中。
  7、在室温下孵育30分钟。
  8、轻摇孔中的内容物。每孔用400 ?L稀释的洗涤溶液冲洗孔4次(如果使用了平板清洗机)-或-每孔用300 ?L稀释的洗涤溶液冲洗孔4次以进行手动洗涤。在吸收纸上剧烈打孔以去除残留的液滴。
  9、向每个孔中添加100 ?L底物溶液。
  10、在室温下孵育15分钟。
  11、通过向每个孔中添加100 ?L终止液来终止酶促反应。
  12、用微量滴定板读数器测定每个孔在450±10 nm处的吸光度(OD)。建议在添加终止液后10分钟内读取孔。
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