麻疹病毒IgG, ELISA检测试剂盒
【前言简介】
麻疹是一高传染性的病毒病,它早期的临床前兆有:发烧、鼻炎、结膜炎、咳嗽和病理性的皮疹(口腔黏膜疹:Koplik斑)。由麻疹病毒引起的皮疹在其早期症状出现3到5天后出现,有些在接触麻疹病毒14天后出现,而且还有可能伴随有皮肤水肿。这种疾病是由副黏液病毒科麻疹病毒属的麻疹病毒所引起的。它还可引起中耳炎、肺炎和脑炎的并发症。在小孩和营养不良的儿童中,麻疹病毒可引起更严重的表现:出血性麻疹的发病率更高,有5%到10%的死亡率。接种了无活性麻疹疫苗的人(1968年以前),其感染会有严重的表现:肺炎、全身水肿,胸腔积液和非典型皮疹。麻疹是具有高传染性的疾病之一。麻疹病毒通过来自被感染病人呼吸道的飞沫传播,也可直接通过接触传播。自从接种麻疹疫苗后,麻疹的发病率就开始降低了,麻疹病毒IgG检测试剂盒-IBL除了用于诊断辅助,可以用来监测疫苗效价。
【检测原理】
麻疹病毒IgG检测试剂盒-IBL,是一款酶免法的试剂盒,规格为96孔。此固相ELISA试剂盒利用的夹心法原理。微孔板上包被了抗原。用对人IgG具有特异性的酶标二抗来检测结合到包被抗原的样品特异性抗体。底物反应后,所显示的颜色强度与检测到的IgG特异性抗体的量成正比。样品的结果可直接使用标准曲线得。
【检测步骤】
1) 加100µL标准品,质控品和已稀释样本于相应反应孔中,在定性检测中只使用标准品B。双孔检测可提高分析可靠性。
2) 封板后37℃温育60分钟。
3) 移去封板纸,弃去孔中液体。用300µL洗涤液洗板3次,在吸水纸上拍干。
4) 在每一微孔中加入100µL酶联物。
5) 封板后室温37℃温育60分钟。
6) 移去封板纸,弃去孔中液体。用300µL洗涤液洗板3次,在吸水纸上拍干。加底物液和终止液时,如果有条件的话,可使用8孔微量移液器。确保底物液和终止液都是相同的时间间隔加入。使用确切容积并避免气泡产生。
7) 每孔加TMB底物液100µL。
8) 室温(18℃-25℃)避光温育30分钟。
9) 在每一微孔中加入100µLTMB终止液以终止底物反应。轻轻摇动微孔板以使试剂混合均匀。此时,颜色蓝色变成黄色。
10) 加终止液后60分钟内在450nm处测OD值。
【结果计算】
定性评估
临界值是直接从标准品B中得出。临界指标(COI)是由样本的平均OD值和临界质控的平均OD值计算得出来的。如果样本的平均OD值在临界值上下10%内,则该样本应判定为可疑样本;样本平均OD高则应判定为阳性;样本平均OD值低则应判定为阴性。
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