脊髓灰质炎病毒IgG检测试剂盒(酶联免疫法)
ELISA方法操作结果判断过程常见问题及解答
1) 标准曲线线性差,或者没有运行标准曲线;质控不在控。
2) 出现假阴性结果或假阳性结果
3) 测定结果的重复性差
4) 全部板孔不显色或全部显色,无法判断结果
解决方法:
加样时,不同浓度标准品使用不同枪头。标准品稀释过程要保证量和均匀性。标准品可做复孔测定,明显偏离的标准品可舍去。每次测试,都要运行标准品和质控品,以保证结果的准确。质控品不在质控单检测范围内时,说明实验无效,不能报告实验结果,需要重新检测。
出现假阴性样本可能是孵育温度和时间不足,酶标记物加样量不足,显色时间短等原因,读数时终止时间过长等,应严格按照说明书操作要求进行;
出现假阳性样本可能是洗涤不充分,酶过量,类风湿因子干扰,样本溶血,脂血等,实验过程中,注意样本要求,洗板步骤,保证充分洗板,酶标记物加样量要准确,显色时间充分,终止后尽快读板等。
重复性差可能是加样本及试剂量不准,孔间不* ;加样过快,孔间发生污染 ;加错样本 ;加样本及试剂时,加在孔壁 ;不同批号试剂盒中组分混用 ;温育时间、洗板、显色时间不*等,实验过程要注意上述操作。
整板不显色可能是忘记加酶或者试剂失效,酶污染,错加试剂等;整板显色可能是洗涤液被酶污染,显色液变质,包被板不干净等;实验过程中,应注意避免试剂的污染或交叉污染,加样前认真辨别试剂,避免错误加样。
通用名称:脊髓灰质炎病毒 IgG检测试剂盒(酶联免疫法)
英文名称:Poliovirus IgG ELISA
公司品牌:德国IBL
产品货号:RE56921
产品规格:96T
检测样本:血清和血浆
储存条件:2—8℃
检测方法:ELISA
预期用途:仅用于科研,体外检测使用
参考价格:询价
供应商家:深圳市科润达生物工程有限公司
脊髓灰质炎病毒ELISA检测试剂盒产品规格
96T
脊髓灰质炎病毒ELISA检测试剂盒预期用途
脊髓灰质炎病毒Igg抗体检测试剂盒RE56921可用于血清和血浆中抗脊髓灰质炎特异性IgG抗体的定性和定量检测。
脊髓灰质炎病毒 IgG检测试剂盒简介
脊髓灰质炎是一种由肠道病毒引起的传染病,它广泛流行于世界各地,并常常导致病人瘫痪和死亡。人类目前知道的人致病性脊髓灰质炎有三种类型:
1类(Brunhilde):通常会产生严重的症状。
2类(Lansing):出现稍微温和的症状。
3类(Leon):少,但伴随严重症状。
脊髓灰质炎病毒主要增生扩展在肠道的淋巴节内,并通过粪便排泄出去。咽喉也可能会感染脊髓灰质炎病毒,之后病毒就会遗留在人体口腔内。人感染脊髓灰质炎后,病毒就可以通过单核细胞分布到其它淋巴节,之后在淋巴节繁殖成各种脊髓灰质炎病毒。在第二个病毒血症阶段,病毒就停留在所有的器官和中枢神经系统的其它器官中。在90%以上感染了脊髓灰质炎的病人都不会出现任何主观症状,而其它剩余的病例中会出现:伴随低烧的非特异性疾病、头痛和喉咙发炎、痢疾、呕吐。
脊髓灰质炎目前还没有治疗方法,仅有阿司匹林和适当的运动对症治疗会有些效果。通过检测粪便或咽喉冲洗物中的传染原或检测血液中的抗体可诊断脊髓灰质炎。血液抗体的检测通常是通过中和检测进行的,双份血清检测有滴度差异,所以三种类型脊髓灰质炎病毒必须分别检测。最近,脊髓灰质炎IgG ELISA实验用类似白喉和百日咳的方法进行了改进,这种新的ELISA试剂盒可同时检测三种类型的脊髓灰质炎病毒。这种血清学反应是由既往感染或免疫接种所导致的。
脊髓灰质炎病毒 IgG检测试剂盒检测原理
脊髓灰质炎病毒Igg抗体检测试剂盒RE56921是一种利用夹心法的固相酶联免疫试剂盒。微孔用抗原包被,样品中的特异性抗体结合到微孔中抗原上,之后加入对人IgG具有特异性的酶标二抗。之后再加入底物液,微孔中溶液所显示的颜色强度与检测到的特异性抗体的量成正比。样品的结果可直接从标准曲线上获得。
脊髓灰质炎病毒 IgG检测试剂盒组成成分
4×2ml | CAL A-D | 标准品A-D 1;10;50;150U/ml,即用 标准品A=阴性质控 标准品B=临界质控 标准品C=弱阳性质控 标准品D=阳性质控 含抗脊髓灰质炎病毒IgG抗体,PBS,稳定剂 |
1×15ml | ENZCONJ IgG | 红色,即用 含辣根过氧化物酶标记的抗人IgG,蛋白缓冲液,稳定剂 |
1×12×8 | MTP | 微孔板,包被有特异性抗原 |
1×15ml | TMB SUBS | 底物液,内含TMB,即用 |
1×15ml | TMB STOP | 终止液,0.5M的硫酸,即用 |
1×60ml | DILBUF | 稀释缓冲液,PBS,BSA,0.1%的叠氮钠,即用 |
1×60ml | WASHBUF CON | 洗涤缓冲液,10倍浓缩,PBS,吐温20 |
2× | FOIL | 封板纸,温育期间用来盖板用。 |
1× | BAG | 自封袋,可重新密封,用来储存不用的板条。 |
脊髓灰质炎病毒 IgG检测试剂盒储存条件
脊髓灰质炎病毒 IgG检测试剂盒必须储存于2~8℃的环境中,避免高温或太阳直射。样品和试剂的储存和稳定性将在相关章节阐述。开封微孔板在有效期内稳定,但在2~8℃环境下储存时请把包装袋密封好。
脊髓灰质炎病毒 IgG检测试剂盒检测步骤
加100ul标准品(A-D)和已稀释的样本于相应反应孔中.定性检测中标准品仅用标准品B.
封板后室温(18℃-25℃)温育60分钟。
弃去孔中反应液,每孔用300ul洗涤液洗板3次,吸水纸上拍干。
加100ul酶联物于每个反应孔中。
封板后室温(18℃-25℃)温育30分钟。
弃去孔中反应液,每孔用300ul洗涤液洗板3次,吸水纸上拍干。
每孔加TMB底物液100ul
室温(18℃-25℃)避光温育20分钟
依加底物的顺序每孔加100ul终止液
1小时内在450nm处读吸光度
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