双氢睾酮(DHT)ELISA试剂盒
ELISA操作试剂准备过程及问题解答
试剂盒和样本不平衡,直接打开后进行检测
浓缩试剂如洗涤液等未进行稀释,直接使用;
冻干试剂溶解不充分,解冻样本使用前不混匀;
标准品稀释不当,酶标试剂配制时间不当
解决办法:
1) 试剂盒使用前应整体取出,在室温下平衡30min后再进行测定;
2) 根据产品标签或说明书要求,对浓缩试剂采用适当的溶剂稀释,并按要求保存或使用;
3) 冻干试剂溶解后,要放置15min左右,使用前再次混匀;冻存样本溶解后,可轻轻振荡混匀,如有颗粒或沉淀,需离心后取上清备用。
4) 标准品如需稀释,按照说明书要求进行,稀释量至少多于加样量的20%。部分酶标试剂要求加样前现配现用,应按照要求配制,避免提前配制导致酶的失活。
通用名称:双氢睾酮(DHT)ELISA试剂盒
英文名称:Dihydrotestosterone (DHT)
公司品牌:德国DRG
储存条件:2-8℃
检测方法:ELISA方法
预期用途:仅用于科研,体外检测使用
参考价格:询价
产品货号:EIA-4132
产品规格:96T
检测样本:血清
供应商家:深圳市科润达生物工程有限公司
双氢睾酮ELISA试剂盒产品规格
96T
双氢睾酮ELISA试剂盒预期用途
双氢睾酮(DHT)ELISA试剂盒可用于人血清中双氢睾酮的检测。
双氢睾酮(DHT)ELISA试剂盒简介
5α-双氢睾酮(DHT)是一种类似于睾酮和雄烯二酮的类固醇激素,属于雄性激素类。 DHT是一种含19个碳的类固醇,并具有雄性激素的活性。DHT对SHBG的亲和力是睾酮对SHBF亲和力的3倍。在男性中,有70%的DHT是由外周睾酮转化而来;而在女性中,大多数DHT是由雄烯二酮转化而来。肝是抑制雄性激素功能的主要器官。因此,类固醇激素在肝中都会发生结构改变,临床倾向:在克兰费尔特综合征中,DHT的水平比正常人的要低很多。
在先天性多毛症患者中,有40%以上患者的DHT水平都会升高。在多囊卵巢患者中,大约35%患者的DHT水平会升高。人们已经证实:人睾丸的生精小管可产生DHT。因此,在生精小管受损时,DHT的生成就会受阻,从而导致血浆DHT水平降低(例如:生殖细胞不发育症和精子缺乏症患者)。无睾畸形患者的血浆DHT的水平就非常低。据报道:在一些前列腺癌患者中(特别是第四阶段),DHT的检测有益于预测抗雄性激素治疗的治疗效果。
双氢睾酮(DHT)ELISA试剂盒检测原理
双氢睾酮激素检测试剂盒ELISA采用的是典型的竞争法。(标准品、质控品和病人样品中的)未标记抗原和酶标抗原竞争结合包被板上有限的抗体结合位点。洗板以除去未结合的物质。洗板后,加入酶底物液。最后加入终止液以终止酶反应,并在酶标仪上读取OD值。包被孔中溶液所显示的颜色与样品中DHT的量成反比。实验中所用的标准品可作一条标准曲线,我们可以直接从标准曲线上读取样品和质控品中DHT的量。
双氢睾酮(DHT)ELISA试剂盒样品的采集与储存
进行一次双份检测大概需要0.2ml血清。采集4-5ml血液到相应的标记试管中,并待其凝血,离心获取血清。4℃下可稳定存放24个小时,如果实验过几天再做,可将样品冻存-10℃的环境或更低温度下。所有的人样本应当作可能的生物危害材料,处理时应采取适当的措施。
双氢睾酮(DHT)ELISA试剂盒成分
1.包被兔抗DHT抗体的可拆包被板,即用。
内含:包被抗DHT抗体的96孔包被板,密封于含干燥剂的包装袋中。
HRP标记的DHT酶联物,100倍浓缩,需要配制。
2.HRP标记的DHT酶联物,100倍浓缩,需要配制。
内含:HRP标记的DHT酶联物、蛋白缓冲液和无汞防腐剂。
体积:200μl/支。
3.DHT标准品,即用。6支。
内含: DHT、人血清白蛋白和无汞防腐剂。用缓冲液和一定量的DHT制备而成。
下表为标准品的大概浓度,具体浓度请见试剂瓶标签:
标准品 | 浓度 | 体积/支 |
标准品 A | 0 pg/ml | 2.0 ml |
标准品 B | 25 pg/ml | 0.6 ml |
标准品 C | 100 pg/ml | 0.6 ml |
标准品 D | 500 pg/ml | 0.6 ml |
标准品 E | 1000 pg/ml | 0.6 ml |
标准品 F | 2500 pg/ml | 0.6 ml |
4.质控品,即用,2支。
内含:DHT、人血清白蛋白和无汞防腐剂,用缓冲液和一定量的DHT制备而成,可接受范围请见试剂瓶标签。
体积:0.6ml/支。
5.冼涤液,10倍浓缩,需要配制,1瓶。
内含:缓冲液、非离子型去垢剂和无汞防腐剂。
体积:50ml/瓶。
6.试验缓冲液,即用,1瓶
内含:蛋白缓冲液和无汞防腐剂。
体积:15ml/瓶。
7.TMB底物液,即用,1瓶
内含:TMB、过氧化氢和非DMF或DMSO。
体积:16ml/瓶
8.终止液,即用,1瓶
内含:1M的硫酸
体积:6ml/瓶
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