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产品名称:人骨桥蛋白(OPN)酶免试验试剂盒

产品型号:27158

更新时间:2020-11-05

产品报价:

产品特点:人骨桥蛋白(OPN)酶免试验试剂盒,骨桥蛋白(OPN)来源于骨基质,是一种分泌型糖蛋白。目前已发现多个细胞分泌高酸性的钙结合的糖基化磷蛋白,包括骨细胞,肾小管细胞,巨噬细胞,活化的T细胞和血管平滑肌细胞。分子量的大小取决于其糖基化和磷酸化程度,范围为66~44kDa

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27158人骨桥蛋白(OPN)酶免试验试剂盒的详细资料:

人骨桥蛋白(OPN)酶免试验试剂盒

(日本IBL  27158)

简介

骨桥蛋白(OPN)来源于骨基质,是一种分泌型糖蛋白。目前已发现多个细胞分泌高酸性的钙结合的糖基化磷蛋白,包括骨细胞,肾小管细胞,巨噬细胞,活化的T细胞和血管平滑肌细胞。分子量的大小取决于其糖基化和磷酸化程度,范围为66~44kDa

OPN的一个重要特点是含有精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD)序列,如纤维蛋白,连蛋白和其他胞外蛋白,通过该序列可与细胞表面整合素受体结合,如αvβ3

另一重要特点,由于RNA连接,糖基化,磷酸化,硫酸化和对蛋白酶的敏感度不同,OPN在机体内以多种分子形式存在。OPN和凝血酶同时存在于受伤,炎症,血管再生和肿瘤组织位点。OPN易水解,这一过程可能有着重要的生理学意义。OPN片段的氨基末端含有一个隐藏的结合位点,可识别整合素α9β1,而且OPN还含有多个细胞结合位点,与多个受体反应;这些反应都有着不同的功能

实验原理

此试剂盒根据酶免法的夹心原理,利用两种不同的高特异性抗体,TMB作为着色剂,颜色强度与人OPN的量成正比

两种抗体如下:

包被抗体:抗人OPN(O-17)兔IgG,抗体反应部分,人OPN的N-端标记抗体

HRP标记的抗人OPN(10A16)小鼠IgG Fab, 抗体反应部分,人OPN凝血酶裂解位点的右侧

检测范围

5~320ng/mL(76.9~4920pg/mL)

预期用途

仅供研究,不能用于诊断

  1. 此试剂盒可用于EDTA-血浆,尿液或细胞上清中人OPN的体外定量检测。由于OPN分子是不稳定的蛋白,请在使用前将其储存于-80℃,放置室温或反复冻融会使检测值降低
  2. 建议EDTA-血浆样品用EIA缓冲液或PBS5~10倍的稀释,如果5~10倍的稀释还是超出了zui高标准品值,则需进一步稀释
  3. 血清或肝素血浆样品的检测结果可能不是正确值,因为OPN不稳定,易被凝血酶裂解,而且OPN分子上有若干个肝素结合位点,所以肝素血浆也会影响试验
  4. 建议尿液样品用EIA缓冲液或PBS200倍稀释,但各实验室应zui优化稀释率。由于尿液样品易分解,建议加入PMSF(蛋白酶抑制剂)等。样品采集后不能立即检测,应贮存于-80℃或更低,避免反复冻融,否则其检测值降低。尿液中OPN的量与尿液的体积成反比,建议用肌酸酐补偿进行检测
  5. 细胞上清的稀释比例因细胞而异,各实验室以zui优化稀释比例稀释
  6. 此试剂盒不能检测凝血酶裂解的人OPN
  7. 重组的和天然的人OPN都可用此试剂盒检测

试剂盒组成

  1. 包被板,96孔,包被有抗人OPN(O-17)兔IgG,亲和纯化
  2. 标记抗体浓缩,30X,0.4mlx1,HRP标记的抗人OPN(10A16)小鼠IgG Fab,亲和纯化
  3. 标准品,0.5mlx2,重组人OPN
  4. EIA缓冲液,30mlx1,0.05%吐温20的PBS
  5. 标记抗体稀释液,12mlx1,1%BSA,含0.05%吐温20的PBS
  6. 着色剂,15mlx1,TMB底物液
  7. 终止液,12mlx1,1N硫酸
  8. 洗涤缓冲浓缩液,50mlx1, 40X,含0.05%吐温20的磷酸缓冲液
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